樟芝多糖抑制6-OHDA诱导的多巴胺能神经元细胞炎症反应的作用机制研究

目的 探究樟芝多糖通过抑制ROS-NLRP3-caspase-1途径调节6-羟基多巴胺（6-hydroxydopamine，6-OHDA）诱导的多巴胺能神经元（dopaminergic neurons，DAN）细胞炎症反应的作用。方法 分离小鼠中脑DAN细胞，采用6-OHDA体外构建帕金森病细胞模型，将细胞分为正常组、模型组、对照组、实验组。正常组为常规培养的DAN细胞，模型组为6-OHDA处理的DAN细胞，对照组为ROS抑制剂乙酰半胱氨酸（NAC）+6-OHDA处理的DAN细胞，实验组为6-OHDA+樟芝多糖处理的DAN细胞。采用CCK-8法检测细胞活力，流式细胞术和免疫荧光染色法检测ROS的水平，流式细胞术检测细胞凋亡水平，Hoechst 33342染色活细胞，蛋白免疫印迹（Western-bolt）法检测细胞中NLRP3、caspase-1、pro-caspase-1的表达水平，酶联免疫吸附（Elisa）法检测上清中IL-1β、IL-6和IL-18的分泌水平。结果 模型组中6-OHDA可以诱导DAN细胞炎症反应，ROS表达增高，NLRP3-caspase-1炎性小体水平增高，细胞凋亡率增高，相比正常组具有显著性差异（P<0.05）。樟芝多糖干预后，ROS的水平下调，NLRP3-caspase-1炎性小体水平降低，细胞凋亡率下调，相比模型组具有显著性差异（P<0.05）。结论 樟芝多糖可以通过抑制ROS-NLRP3-caspase-1途径调节6-OHDA诱导DAN炎症反应，这可能是樟芝多糖在帕金森病炎症反应中的作用机制之一