单端孢菌素逆转肺癌耐药A549/DDP细胞耐药性及其机制研究

目的 探讨单端孢菌素对肺癌耐顺铂细胞系A549/DDP顺铂耐药性的逆转作用及机制。方法 应用MTS法检测单端孢菌素对A549/DDP细胞顺铂敏感性的影响，流式细胞术检测肿瘤细胞表面P-糖蛋白(P-Glycoprotein，P-pg)表达以及胞内罗丹明-123(Rhodamine-123，Rh-123)含量的变化，生化法检测细胞内SOD和GSH的水平，Western blot法和Real time PCR检测肿瘤细胞多药耐药蛋白MDR1、MRP1和Survivin表达的变化，Western blot法检测Akt磷酸化的变化，液相芯片法检测TGF-β，IL-6和IL-8的变化，应用双萤光报告基因技术检测细胞NF-κB和AP-1转录活性。结果 单端孢菌素可增加细胞对顺铂的敏感性，经5 μg?mL-1和10 μg?mL-1单端孢菌素作用72 h后，耐药逆转倍数(RF)为1.84和3.95倍。经5 μg?mL-1和10 μg?mL-1单端孢菌素作用24 h后，肿瘤细胞P-gp表达分别下降了62.6%和19.8%，细胞中Rh-123含量分别提高了183.3%和308.3%，细胞内SOD水平下降65.2%和50.1%，GSH水平下降 71.6%和46.3%，MDR1的mRNA水平下降了72.7%和52.3%，MRP1的mRNA水平下降了64.0%和22.5%，Survivin的mRNA水平下降了45.8%和14.7%，Akt磷酸化水平下降，TGF-β分泌水平下降了80.2%和51.5%，IL-6分泌水平下降了73.4%和37.2%，IL-8分泌水平下降了71.2%和43.2%，NF-κB转录活性下降42.3%和22.7%，AP-1的转录活性下降了57.4%和32.5%。结论 单端孢菌素逆转A549/DDP对顺铂的耐药性，这一作用与抑制药物外排，负调控肿瘤耐药相关蛋白的表达有关