人参皂苷Rb1拮抗达沙替尼抑制NK细胞杀伤卵巢癌的研究

目的 研究抗癌药达沙替尼对自然杀伤细胞(NK细胞)杀伤卵巢癌细胞的抑制效应，并探讨人参皂苷Rb1拮抗这种免疫抑制效应的作用及其分子机制。方法 分别用达沙替尼、人参皂苷Rb1以及达沙替尼联合人参皂苷Rb1预处理NK细胞，未经药物处理的NK细胞设为对照。采用CFSE/PI双染色法，经流式细胞仪检测与NK细胞混合培养的卵巢癌HO-8910细胞的死亡率来明确NK细胞的杀伤功能；采用Annexin V-FITC/PI双染色法测定NK细胞的凋亡率来明确其生存活力；采用real-time PCR法测定NK细胞颗粒酶B的mRNA表达量；采用免疫印迹法检测NK细胞ERK的蛋白水平。结果 与对照组相比，达沙替尼处理组的NK细胞对卵巢癌HO-8910细胞的杀伤率显著下降(P<0.01)，NK细胞的颗粒酶B的mRNA水平和磷酸化ERK(pERK)表达均下调；达沙替尼合并人参皂苷Rb1处理组的NK细胞对卵巢癌HO-8910细胞的杀伤率较达沙替尼组升高(P<0.05)，而且颗粒酶B的mRNA水平、pERK表达均较达沙替尼组有所恢复；与对照组相比，人参皂苷Rb1单独处理组的NK细胞的生存活力、颗粒酶B水平、pERK表达量以及杀伤功能均无显著差异(P<0.05)。结论 达沙替尼对NK细胞杀伤卵巢癌细胞有抑制效应，可能与下调NK细胞的杀伤介质颗粒酶B和抑制ERK磷酸化有关。人参皂苷Rb1虽然不能直接活化NK细胞，但是能拮抗达沙替尼对NK细胞的上述抑制效应，提示联用人参皂苷Rb1能减少抗癌药物达沙替尼对免疫效应细胞的抑制作用