高灵敏度HPLC测定大鼠血浆中益母草碱浓度及其药动学研究

目的 建立一种高灵敏度HPLC测定大鼠血浆中益母草碱浓度，并研究益母草碱在大鼠体内的药动学特征。方法 大鼠口服益母草碱混悬溶液（50 mg?kg-1）后，不同时间点尾静脉采血，以苯甲酰精氨酸乙酯为内标，血浆样品经酸化后乙酸乙酯萃取，采用HPLC进行测定。色谱条件：采用Diamonsil C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）为色谱柱，以乙腈-0.02 mol?L-1磷酸二氢钾缓冲溶液（pH 3.0）（22：78）为流动相，流速1.0 mL?min-1，柱温35℃，检测波长277 nm。并利用PKS 1.0软件计算药动学参数。结果 益母草碱血浆浓度在0.05~1.5 μg?mL-1内线性关系良好（r=0.999 1）。方法的定量下限（LLOQ）为0.05 μg?mL-1（RSD=12.8%，n=5）；提取回收率为76.5%~82.5%；批内、批间准确度为96.9%~104.9%；日内、日间精密度均<10%；质控样品经反复冻融3次及-20℃放置1个月后均较稳定。大鼠口服益母草碱后，药-时曲线符合二室开放模型，主要药动学参数为tmax=0.95 h，Cmax=0.51 μg?mL-1，t1/2=3.64 h，AUC0-t=1.56 μg?mL-1?h-1，AUC0-∞=1.78 μg?mL-1?h-1。结论 该方法准确度、灵敏度高，重复性好，可用于生物样品中益母草碱浓度的测定