RAPD影响因素的研究及实验条件的优化进

摘要： 针叶树种红松(Pinus koraiensis)和阔叶树种蒙古栎(Quercus mongolica)为材料,研究了随机扩增多态DNA(RAPD)的影响因素,优化了各种实验条件。RAPD对模板浓度的适应范围比较广,从10~80ng/反应均可得到一致的结果;dNTP的适宜浓度为150~300mmol/L;TaqDNA聚合酶的用量以1~2U为佳。对于十个碱基的随机引物,合适的复性温度为35~37℃;1min的延伸时间足以满足2kb以下的DNA片段的合成;热循环的次数以40次为宜。按照优化的RAPD条件进行的重复实验,重现性良好