抗逆基因AtRPK1启动子关键顺式作用元件的研究

摘要： 为确定拟南芥抗逆相关基因AtRPK1启动子的顺式功能元件，对其启动子区进行了分段克隆。通过5′端缺失方法得到203、316、604、809 bp 4个启动子片段，分别构建成p1300-pro-GUS表达载体，并转入拟南芥，进行GUS染色和GUS定量检测。通过对809 bp全长启动子转基因拟南芥GUS染色发现，转基因拟南芥的叶片、茎、花、根中均有表达，在分生能力强的组织和维管束集中的组织，AtRPK1基因启动子具有较高启动表达能力。5′端缺失启动子检测结果表明，转录起始点到启动子上游114位点区域包含AtRPK1基因启动子的关键顺式作用元件。对启动子缺失片段转基因植株利用200 mmol·L-1 NaCl胁迫3 h后，β-葡萄糖苷酸酶活力定量检测结果表明，在启动子上游-19位点处的GT-1顺式作用元件GAAAAA可能直接与盐胁迫应答相关