番茄醇酰基转移酶基因SlAAT1克隆、序列分析和原核表达

摘要： 酯类物质是许多果实香气的主要成分。醇酰基转移酶(AATs)是酯类化合物合成的关键酶。本研究通过反转录PCR，从番茄的成熟果实中克隆了SlAAT1基因(GenBank登录号为JQ070977)，其编码一个含有442个氨基酸残基的蛋白，含有醇酰转移酶BAHD家族的H-x-x-x-D和DFGWG保守基序。系统进化分析表明，SlAAT1与苹果MpAAT1，山字草的BEBT及烟草Hsr201等聚在同一分支，进化关系较近。SDS-PAGE电泳分析表明，转化SlAAT1基因的大肠杆菌BL21(DE3)在22℃、0.8 mmol·L-1 IPTG条件下可获得大量的可溶性目标蛋白。同时，纯化的SlAAT1大肠杆菌重组蛋白的体外酶活性分析表明了SlAAT1重组蛋白具有醇酰基转移酶活性，可能参与了酯类挥发性成分的合成