中国特有植物血水草RAPD反应体系的优化

摘要： 为建立血水草的RAPD-PCR最佳反应体系，对影响血水草RAPD反应的Mg2+、模板DNA、dNTPs、引物浓度和Taq聚合酶用量等因素进行优化。结果表明：25 μL反应体系中含10×Buffer 2.5 μL，1.8 mmol·L-1 Mg2+，2U Taq DNA聚合酶，50 ng模板，0.2 mmol·L-1 dNTPs，1.6 μmol·L-1引物。扩增程序为：94℃预变性2 min；预扩增：94℃变性20 s，36℃退火30 s，72℃延伸75 s，5个循环；扩增：94℃变性20 s，40℃退火30 s，72℃延伸60 s，40个循环；72℃保温20 min，4℃保存。所建立的血水草RAPD-PCR反应体系具有标记位点清晰、反应系统稳定、检测多态性能力强、重复性好等特点，可以较好地应用于血水草的遗传多样性分析研究