红皮云杉与嫩江云杉RAPD和ISSR分子标记反应体系优化和特异性检测

摘要： 以红皮云杉和嫩江云杉为材料，采用现代分子标记技术-RAPD和ISSR标记研究红皮云杉与嫩江云杉间在基因组水平上的遗传差异。通过正交试验设计筛选RAPD和ISSR反应程序和反应体系。从近100个引物中筛选出3个RAPD引物和一个ISSR引物用来区分红皮云杉和嫩江云杉，它们分别是OPN07、OPA17、S25和ISSR67。用这4个引物扩增两种云杉基因组DNA，分别在1 000，950，1 500，2 000 bp处嫩江云杉有特异性谱带而红皮云杉没有。研究表明，采用RAPD和ISSR分子标记可以将红皮云杉和嫩江云杉在分子水平上加以区分，为今后进一步阐明云杉的系统进化，物种鉴定和种间杂交育种提供了理论依据