南蛇藤原生质体培养及植株再生

摘要： 以4℃低温暗处理24 h的南蛇藤胚性愈伤组织为分离原生质体的原材料，用MS培养基进行液体浅层静置、固液双层以及琼脂糖包埋培养原生质体，获得再生愈伤组织并分化成苗，建立了原生质体培养体系。结果表明，低温暗处理利于高产率高质量原生质体的获得；0.5%纤维素酶+0.5%果胶酶+5 mmol·L-1 MES为酶的最佳配方；12 h为最佳酶解时间；13%为甘露醇最佳浓度；静置12 h+振荡0.5 h为最佳酶解方式；液体浅层静置培养取得了较好的原生质体培养效果；MS+6-BA 2.0 mg·L-1+IBA 0.1 mg·L-1为愈伤组织最佳分化培养基；1/2MS+NAA 0.1 mg·L-1为最佳生根培养基