植物抗逆蛋白（LEA3）22-氨基酸耐盐结构域在酵母细胞中的鉴定

摘要： 大豆PM2蛋白属LEA3 （late embryogenesis abundant 3）蛋白。本文构建了编码PM2全长及含22-氨基酸结构域多肽（PM2、PM2A、PM2B和 PM2C）的酵母表达载体。转化酵母得到四种重组菌。SDS-PAGE电泳和ESI-MS/MS或MALDI-TOF/TOF质谱结果表明，重组菌可表达目标多肽。测定对照菌及重组菌在无胁迫、高盐（1.5 mol·L-1 NaCl）和高渗透（2 mol·L-1山梨糖）下的生长曲线。结果表明，在高盐胁迫下，四种重组菌胁迫后的恢复明显好于对照菌。多肽对高盐耐受能力的大小为:PM2C>PM2B≈PM2A≈PM2。证明大豆PM2蛋白的表达可提高酵母耐盐性，且22-氨基酸基序为PM2蛋白的耐盐结构域。结合前文在大肠杆菌中的结果，为“LEA蛋白可以类似机制参与原核和真核生物耐盐保护作用”的假说提供实验支持。然而，在高山梨糖胁迫下，对照菌和酵母重组菌的生长情况无明显差异