冰冻切片技术在铁皮石斛显微结构上的应用

摘要： 为了快速高效的观察兰科植物铁皮石斛的显微结构，利用光镜和改进的蔗糖保护——液氮速冻冰冻切片法，观察铁皮石斛根、茎、叶的显微结构。该技术方法是将铁皮石斛器官经过蔗糖磷酸缓冲液保护液处理后抽真空，再经过液氮速冻、包埋、切片、展片观察、染色以及拍照等步骤，制作出铁皮石斛根、茎和叶较完整的显微结构切片。研究结果表明，适合铁皮石斛根的最适条件为：蔗糖质量体积分数为8%、冷凝温度-25℃、切片厚度20 μm；茎的最适条件为：蔗糖质量体积分数为16%、冷凝温度-20℃、切片厚度15 μm；叶的最适条件为：蔗糖质量体积分数为4%、冷凝温度-20℃、切片厚度10 μm。该研究在兰科植物显微结构观察和组织化学研究中将具有广阔的应用前景