|
|
植物研究 2011
重组蛋白GST-OsCATB的表达特性研究DOI: 10.7525/j.issn.1673-5102.2011.06.009 Keywords: 过氧化氢酶（CAT）,水稻,谷胱甘肽S-转移酶融合蛋白（GST）,蛋白纯化,E.coli Abstract: 摘要： 为了阐明水稻Catalase（CAT）的酶学功能，首先需要获得出足量的、活性的该酶蛋白。本研究克隆了水稻OsCATB基因(GenBank accession No.D26484)，构建到原核表达载体pGEX-6p-3中形成重组蛋白，继而转入E.coli菌株BL21中进行表达特性研究。结果表明，GST-OsCATB融合蛋白在E.coli中进行了过量表达，表达受到诱导剂浓度、诱导时间、诱导温度和诱导体系等多因素影响；通过谷胱甘肽Sepharose-4B亲合层析，纯化出足量、活性的融合蛋白GST-OsCATB，每克表达细胞（干重）中得率为51 mg GST-OsCATB
|
