RT-PCR克隆甜菜硝酸还原酶cDNA全长序列及分析

摘要： 根据GenBank中已公布的甜菜（Beta vulgaris）硝酸还原酶（nitrate reductase）基因序列（gb∣ABW05098.1∣），设计引物，以50 mmol·L-1 KNO3溶液处理的甜菜幼苗为材料，从总RNA中通过RT-PCR分离得到一个硝酸还原酶基因，其cDNA长2 760 bp，包含了完整的基因编码序列，与已公布的硝酸还原酶基因序列相似性达99%。Southern杂交分析表明，硝酸还原酶基因在甜菜基因组中可能以两个拷贝或低拷贝形式存在。根据其编码的氨基酸序列，利用生物信息学预测了其亚细胞定位和蛋白质的三级结构