丁苯酞对1-甲基-4-苯基吡啶离子诱导细胞自噬的影响①

摘要： 目的 研究丁苯酞对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的SH-SY5Y细胞自噬相关因子的影响，探讨丁苯酞对帕金森病细胞模型的神经保护作用机制。方法 将 SH-SY5Y细胞分为空白对照组(A组)、MPP+组(B组)、雷帕霉素预处理+MPP+组(C组)和丁苯酞预处理+MPP+组(D组)。采用噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞相对存活率，倒置相差显微镜观察细胞形态的变化，Westernblotting 检测微管相关蛋白 1 轻链 3(LC3)-Ⅱ/Ⅰ、Beclin 1 蛋白表达，RT-PCR 检测 LC3-Ⅱ/Ⅰ和 Beclin 1 mRNA 表达。结果 B 组SH-SY5Y细胞存活率显著低于A组(t=20.270, P<0.001)，C组和D组显著高于B组(t>8.770, P<0.001)，且C组和D组间无显著性差异(t=2.270, P=0.064)。与A组相比，B组LC3-Ⅱ/Ⅰ、Beclin 1蛋白和mRNA表达明显增加(t>6.647, P<0.01)；C组和D组明显高于B组(t>3.630, P<0.01)，C组与 D组间无显著性差异(t<2.238, P≥0.05)。结论 丁苯酞可以提高 MPP+诱导的 SH-SY5Y损伤细胞存活率，其可能通过诱导帕金森病模型细胞自噬，发挥治疗作用