沉默ski基因对大鼠星形胶质细胞活化增殖及Cyclin D1表达的影响

摘要： 目的研究ski基因对大鼠星形胶质细胞增殖的影响及其分子机制。方法分离3日龄Sprague-Dawley大鼠脑皮质星形胶质细胞,体外培养。合成ski和阴性对照小干扰片段。设置ski-siRNA组、阴性对照组和空白对照组,采用脂质体法将特异性针对ski基因的siRNA和阴性对照siRNA转入ski-siRNA组、阴性对照组星形胶质细胞中。Western blotting分析ski、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和Cyclin D1蛋白表达;CCK8法检测星形胶质细胞增殖活力;流式细胞仪检测细胞周期。结果ski-siRNA组星形胶质细胞ski蛋白表达明显降低(F=38.611, P<0.01),GFAP (F=7.547, P<0.05)和Cyclin D1蛋白(F=3.901, P<0.05)表达降低;培养12 h后,ski-siRNA组增殖活力明显降低(F>30.507, P<0.01),G1期细胞比例明显增加,S期明显减少(F>48.425, P<0.01)。结论沉默ski基因可能通过下调Cyclin D1表达,抑制星形胶质细胞增殖