碱性成纤维细胞生长因子-壳聚糖载体诱导神经干细胞向神经元分化并形成突触的研究

摘要： 目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)-壳聚糖载体对神经干细胞(NSCs)的诱导分化作用。方法 原代培养新生24 h Wistar大鼠脊髓 NSCs，纯化后分别向培养基加入单纯壳聚糖、单纯 bFGF和 bFGF-壳聚糖载体。3 d后，行 Nestin和β-微管蛋白Ⅲ免疫荧光染色；7 d后，行微管相关蛋白2 (MAP2)、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和髓鞘碱性蛋白(MBP) 免疫荧光染色；14 d后，行 synapsin-1和 MAP2免疫荧光染色，并利用 MED64平面微电极阵列记录系统检测分化后神经元的电生理活性。结果 培养3 d 后，各组均可见 Nestin+/β-微管蛋白Ⅲ+细胞，bFGF-壳聚糖载体诱导的细胞神经丝长度大于其他两组；7 d 后，各组均可见MAP2+、GFAP+和 MBP+细胞，bFGF-壳聚糖载体诱导的细胞 MAP2+比例高于其他两组；14 d后，bFGF-壳聚糖载体诱导的细胞呈synapsin-1+/MAP2+，且有自发放电现象。结论 bFGF-壳聚糖载体诱导NSCs高比例向神经元分化，且分化而成的神经元之间形成突触，并具有电生理活性