两种体系下诱导多潜能干细胞定向分化为运动神经元前体细胞的差异

摘要： 目的 将人诱导多潜能干细胞(iPSCs)定向分化为脊髓运动神经元前体细胞(MNP),并比较在有无饲养层两种体系下的分化效率。方法 分别在鼠胚胎成纤维细胞饲养层和无饲养层体系中培养人iPSCs。诱导6 d获得神经上皮前体细胞(NEP),诱导12 d获得MNP细胞。倒置显微镜下观察细胞形态变化,免疫荧光染色鉴定iPSCs、NEP、MNP标记物,实时定量聚合酶链反应检测NEP相关基因SOX1、HOXA3,MNP相关基因OLIG2、PAX6,及多能性基因SOX2、OCT4的转录水平。结果 两种体系中iPSCs均表达多能性标记物,NEP及MNP均高表达神经相关标记物,低表达多能性标记物,有饲养层体系中NEP细胞SOX1、HOXA3,MNP细胞OLIG2、OCT4基因表达明显高于无饲养层,PAX6和SOX2表达无显著性差异。结论 iPSCs在两种培养体系均可有效分化为MNP细胞,在有饲养层体系中分化效率较高