丁苯酞注射液对局灶性脑缺血再灌注大鼠的脑保护作用及机制①

摘要： 目的探讨丁苯酞对局灶性脑缺血再灌注大鼠的脑保护机制。方法160 只雄性Sprague-Dawley 大鼠随机分为假手术组(Sham组, n=10)、缺血再灌注组(IR 组, n=50)、丁苯酞高剂量后处理组(高剂量组, n=50)、丁苯酞中剂量后处理组(中剂量组, n=25)和丁苯酞低剂量后处理组(低剂量组, n=25)。后4 组线栓法制作缺血2 h 再灌注模型。Sham组术后24 h 处死，其他各组分别于再灌注6 h、12 h、24 h、48 h、72 h 处死，5 只用于应用原位末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡，免疫组织化学染色法观察沉默信息调节因子2 相关酶1(SIRT1)及过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α (PGC-1α)的表达。Sham组、IR 组及高剂量组另5 只用实时荧光定量PCR检测SIRT1 及PGC-1α的表达。结果与IR 组比较，丁苯酞各剂量组各时间点凋亡细胞数均显著减少(F>160.60,P<0.001)，SIRT1、PGC-1α阳性细胞数显著增多(F>87.20, P<0.001)。与低、中剂量组比较，高剂量组各时间点凋亡细胞数更少(P<0.05)，SIRT1、PGC-1α阳性细胞数更多(P<0.05)，低、中剂量组之间除再灌注6 h 外，也有显著性差异(P<0.05)。与IR 组比较，高剂量组各时间点SIRT1 及PGC-1α mRNA表达均明显增多(t>4.13, P<0.01)。结论丁苯酞能抑制大鼠脑缺血再灌注后细胞凋亡，可能与上调SIRT1 及PGC-1α的表达有关