玻璃化冻存对斑马鱼卵母细胞的影响

采用比色法测定了在不同玻璃化冻存液中冻存1、2、4、8 d时斑马鱼卵母细胞中谷胱甘肽含量和三磷酸腺苷酶的活性，以研究玻璃化冻存对卵母细胞谷胱甘肽含量和线粒体三磷酸腺苷酶活性的影响。试验结果显示，V4组斑马鱼（玻璃化液组分是：1.5 mol/L甲醇、6.0 mol/L乙二醇、0.25 mol/L蔗糖）卵母细胞冻存1、2、4、8 d后存活率最高[分别为（48.89±2.58）%、（39.35±1.34）%、（24.18±2.32）%和（14.56±1.64）%]，显著高于其他组。经玻璃化冻存后，斑马鱼卵母细胞谷胱甘肽含量和线粒体三磷酸腺苷酶活性均随冻存天数的增加而显著下降（P<0.05）。V4组的谷胱甘肽含量[（13.37±0.59） mg/g]和线粒体三磷酸腺苷酶活性较高，线粒体Ca2+三磷酸腺苷酶[（3.823±0.144） U/mg]、Mg2+三磷酸腺苷酶[（4.503±0.144） U/mg]和Na+/K+三磷酸腺苷酶[（7.520±0.198） U/mg\]活性最高。各组细胞的活性随着冻存天数的增加而逐渐下降。试验结果表明，玻璃化冻存不能完全避免低温和冷冻保护剂的毒性和对卵母细胞的损伤