泥鳅HSC70 cDNA克隆及表达分析

采用RT-PCR和RACE技术由泥鳅中克隆获得HSC70 cDNA的全长序列.结果表明,该cDNA全长2338 bp,包括5'非翻译区(5'-UTR) 92 bp,3'非翻译区(3'-UTR)293 bp,开放阅读框1953bp,编码650个氨基酸.预测的蛋白质分子量为71.24 ku,等电点为5.31.该蛋白含有Dnak特征基序和2个HSP70家族标签序列,胞质HSP70特征序列及四肽简单重复序列.该序列与草鱼的相似性最高(97.5％),与人、非洲爪蟾、鸡等的相似性为87.2％～95.4％.半定量RT-PCR显示,HSC70mRNA在正常泥鳅大脑、肌肉、肠、脾脏、肝胰脏、头肾、心脏、卵巢、精巢组织中均有不同程度的表达.以福尔马林灭活温和气单胞菌刺激泥鳅后,泥鳅肝胰脏和脾脏组织HSC70 mRNA表达水平均在15d内显著上升,并在15 d达到峰值;头肾组织HSC70 mRNA表达量在7d迅速上升,在15 d到达峰值;在所有组织中,头肾组织中HSC70 mRNA表达量上升幅度最大,说明头肾在鱼类免疫中发挥重要的作用