迟钝爱德华氏菌 eseB 抗体制备及免疫检测方法的建立

以重组的eseB蛋白为抗原，通过免疫新西兰兔获得了高效价的免疫血清，并建立快速检测迟钝爱德华氏菌的间接ELISA方法。结果显示，用重组eseB蛋白免疫新西兰兔后，ELISA检测血清效价为1∶512000；Western blot检测重组eseB蛋白与多克隆抗体有良好的特异性；通过ELISA检测确定迟钝爱德华氏菌抗原的最佳包被密度为108个／m L ，多克隆抗血清的最佳稀释度为1∶16000，确定其检测迟钝爱德华氏菌的最佳灵敏度为104个／m L ；对不同来源迟钝爱德华氏菌eseB蛋白进行检测，弱毒株15947和ET V与抗血清反应结果为阴性，提示eseB蛋白的表达与其致病性相关，该方法具有较高的特异性