PPARγ对TGFβ/smad信号通路阻遏子c-Ski的上调作用

本文旨在研究过氧化物酶体增殖物激活受体γ (peroxisome proliferator-activated receptor γ, PPARγ)对动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)形成中关键信号通路TGFβ/smad途径的阻遏子c-Ski的调控作用，探讨PPARγ抗AS的分子机制。通过高脂饮食制作大鼠AS模型，检测AS斑块中c-Ski的mRNA及蛋白的表达变化；在体外培养的大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell, VSMC)中转染重组c-Ski质粒，并观察其对VSMC增殖及胶原分泌影响；采用real-time PCR和Western blot检测PPARγ激动剂和拮抗剂对c-Ski表达的调节，进而利用在线程序NUBIScan及荧光素酶报告基因检测明确PPARγ对c-Ski的调控机理。结果显示：AS大鼠动脉斑块中c-Ski mRNA和蛋白表达显著降低；重组c-Ski转染显著抑制大鼠VSMC增殖及胶原分泌；PPARγ激动剂罗格列酮可明显上调大鼠VSMC中c-Ski表达，且这种上调可以被PPARγ拮抗剂GW9662所阻断。生物信息学分析表明c-Ski启动子区有可能的PPARγ结合位点，而罗格列酮也能显著上调转染了c-Ski的报告基因表达。以上结果表明c-Ski具有一定抗AS作用，其可能是PPARγ的又一靶基因，激活PPARγ可上调c-Ski而发挥抗AS作用。