蛋白激酶c和蛋白酪氨酸激酶介导脂多糖及细胞因子诱导大鼠血管平滑肌细胞一氧化氮的生成

采用Sprague- Dawley大鼠胸主动脉中膜、外膜和培养的血管平滑肌细胞(VS MCs)作材料，鉴定不同类型的血管组织经炎性介质刺激后其一氧化氮(NO)的产生来源，阐明蛋白激酶C (PKC)和蛋白酪氨酸激酶( PTK)介导大鼠US MCs生成NO的调控机制。大鼠US MCs经脂多糖(LPS)和细胞因子(TNF a , IL- 1 [3)处理后，以剂量依赖方式促进NO释放。采用stern Blot证实经刺激的US MCs伴有i NOS表达上调。进一步实验表明PKC和PTK参与LPS和细胞因子诱导NO生成的胞内信号转导。用P KC抑制剂H7与VS MCs共培育，H7能明显减少LPS . TNF。和IL-场诱导细胞NO的形成。白屈菜赤碱亦可抑制NO的生成，但HA1004对US MCs的NO生成无抑制作用，提示PKC参与NO的生成与调控。PTK抑制剂genistein和tyrphostin AG18均能抑制由LPS . TNF。和IL-1 [3引发US MCs释放NO，同时伴i NOS蛋白表达下调，而P KC抑制剂不能阻断i NOS的表达。上述观察结果提示，PKC介导LPS和细胞因子诱导细胞合成NO可能是通过i NOS翻译后加工;而PTK则以上调i NOS表达而促增NO生成。