细胞外信号调节激酶1／2信号通路在慢性哮喘模型大鼠支气管平滑肌细胞迁移功能变化中的调控作用

该研究旨在探讨细胞外信号调节激酶1/2（extracellular signal--regulated kinase，ERK1/2）信号通路在慢性哮喘模型大鼠支气管平滑肌细胞（bronchialsmooth muscle cells，BSMCs）迁移能力改变中的调控作用。应用卵清蛋白致敏和雾化方法制备大鼠慢性哮喘模型，体外培养大鼠BSMCs，采用免疫荧光细胞化学、Western blot和RT--PCR方法检测ERK1／2信号通路的表达，分别用平面迁移实验和跨膜迁移实验来评价BSMCs的活动和趋向迁移能力，并比较用和不用ERK1／2信号通路干预剂的差异。Western blot结果显示慢性哮喘模型大鼠BSMCs中总ERK1／2（9.13±0.87）较对照组（4.68±0.59）明显增加，磷酸化ERK1／2（p--ERK1／2）占总ERK1／2的比值（0.55±0.05）较对照组（0.48±0.04）显著提高（n=10，{sl P}<0.01）。慢性哮喘组ERKI和ERK2mRNA的表达（1.83±0.24和1.07±0.11）较对照组（0.58±0.14和0.51±0.12）明显增高（n=10，{sl P}<0.01）。在平面迁移实验中，慢性哮喘大鼠BSMCs的迁移最远距离是对照组的（2.9±0.1）倍，在ERK1／2激动剂表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）刺激下增加到（5．0±0．2）倍，而在30μmol／LPD98059的作用后下降到（1.7±0.2）倍。正常对照大鼠BSMCs平面迁移能力对PD98059的反应较慢性哮喘组弱，仅在100#mu#mol／L PD98059的作用下下降到（0.8±0.1）倍。跨膜迁移实验中，慢性哮喘大鼠BSMCs的跨膜迁移细胞是对照组的（1.9±0.1）倍，在EGF刺激下增加到（3.1±0.2）倍，而在30μmol／LPD98059作用后下降到（1.45±0.2）倍。这些结果表明慢性哮喘模型大鼠BSMCs的迁移能力明显增强，ERK1/2信号通路在该功能变化的调控中可能发挥了重要作用。