人骨髓间充质干细胞向神经细胞分化过程中Notch通路信号分子表达的变化

该研究探讨Noah信号通路在人骨髓间充质干细胞（human mesenchymal stem cells，hMSCs）体外增殖及向神经细胞分化过程中的作用。采集健康自愿者骨髓，体外培养获得hMSCs，取第3代hMSCs，在诱导剂（#beta#--ME，DMSO，BHA）作用下向神经细胞分化。诱导后用免疫细胞化学鉴定神经元特异性烯醇化酶（neuron--specific enolase，NSE）和尼氏体的表达以确定诱导效果：用流式细胞术检测细胞生长周期时相的变化。在诱导前后，用免疫荧光和RT--PCR方法检测Notch通路中Notch1受体蛋白、配体Jagged1（JAG1）、调节蛋白活化相关物早老素1（presenilin 1，PS1）、靶基因hairy and enhancer of split1（HES1）信号分子表达的变化。结果显示：诱导前，处于G_(0)/G_(1)期的hMSCs占58.5％，S+G_(2)/M期的细胞占41.5％；诱导后，G_(0)/G_(1)期细胞比例升高，而S+G_(2)/M期细胞比例下降，NSE阳性细胞率达（77±0.35）％，细胞质中可见深蓝色的块状或颗粒状尼氏体。免疫荧光显示，诱导前后hMSCs内Notch1和JAG1均呈阳性表达，但RT--PCR检测发现诱导后Notch1、JAG1、PSl和HES1 mRNA表达量较诱导前明显降低（均{sl P}<0.05）。结果表明，诱导hMSCs向神经细胞分化能抑制Notch信号分子表达，低水平的Notch信号激活可能有利于神经细胞的分化。