抗钠- 钙交换体-1 重复序列(117-137)抗体对心肌钠- 钙交换电流及钙电流的抑制作用

本研究旨在探讨抗钠-钙交换体(Na+-Ca2+ exchanger, NCX)？？ α-1 重复序列(117-137)抗体对大鼠心肌细胞钠- 钙交换电流的影响。实验用合成的？α-1 重复序列(117-137)肽免疫大鼠制备抗？α-1 重复序列(117-137)抗体；应用全细胞膜片钳技术，在急性分离的心肌细胞上观察抗？α-1 重复序列(117-137)抗体对大鼠心肌细胞钠- 钙交换电流的影响，同时还观察了其对大鼠心肌细胞L 型钙通道、电压门控钠通道和豚鼠心肌延迟整流钾通道电流的影响；最后，采用EMBOSS Pairwise Alignment Algorithms软件对NCX ？α-1 重复序列和L 型钙通道(1 076~1 096)的氨基酸序列进行了比较。结果显示，抗？α-1 重复序列(117-137)抗体对大鼠心肌细胞Na+-Ca2+ 交换电流呈现剂量依赖性的抑制作用。在钳制电压为+50 和？100 mV 时，其抑制外向和内向钠- 钙交换电流的IC50 分别为18.9 和22.4 nmol/L。此外，该抗体还对L 型钙通道电流具有抑制效应(IC50=22.7 nmol/L)，对电压门控钠通道和延迟整流钾通道电流则无明显影响。通过氨基酸序列比对发现，NCX ？α-1 重复序列(117-137)与L 型钙通道IIIS5-S6序列(孔环)之间具有23.8% 的相似性。以上结果表明，抗NCX ？α-1 重复序列(117-137)抗体是心肌NCX 的一种抑制性抗体，同时也可以抑制L 型钙通道。