CyclinD1反义核酸诱导肺腺癌细胞A549的凋亡

为了探讨CyclinD1反义核酸在肺癌基因治疗中的作用，本研究构建了含有CyclinD1反义核酸的表达载体(命名为：pcDNA3.1-CyclinD1)，并将该载体转染肺腺癌细胞A549，进行G418筛选后，获得稳定表达CyclinD1反义核酸的A549细胞(命名为：anti-CyclinD1-A549)。通过MTT法检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞的凋亡情况，结果显示稳定转染CyclinD1反义核酸后，A549细胞增殖显著被抑制，细胞凋亡增加。为探讨CyclinD1反义核酸诱导细胞凋亡的机理，应用Western blot的方法检测了细胞内视网膜母细胞瘤蛋白质(retinoblastoma protein, pRb)、adenovirus E2 factor-1 (E2F-1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)-2和MMP-9的表达，其结果显示，稳定转染CyclinD1反义核酸后，A549细胞内pRb、E2F-1、VEGF、MMP-2和MMP-9蛋白表达均显著降低。以上结果表明，CyclinD1反义核酸可引起肺癌细胞的凋亡，其机制可能与细胞内pRb、E2F-1、VEGF、MMP-2和MMP-9的表达降低相关。