低氧促进神经干细胞向多巴胺能神经元分化

神经干细胞（neural stem cells，NSCs）作为具有多向分化潜能的神经前体细胞，被广泛应用于细胞移植等研究，而低氧不但调节干细胞的体外增殖，在干细胞分化中也具有重要的作用。该文着重探讨了低氧对NSCs分化的调节作用。采用Wistar孕大鼠（E13.5d），分离胚胎中脑NSCs，加入无血清DMEM／F12培养液（含20ng／mL EGF、20ng／mL bFGF、1％ N_(2)和B27），3---5d后传代，细胞培养至第三代进行诱导分化，分别在低氧（3％ O_(2)）和常氧（20％ O_(2)）条件下诱导分化3d，然后在常氧条件下分化成熟5---7d（DMEM／F12含1％FBS、N_(2)和B27）后进行检测。Nestin、NeuN以及TH免疫组织化学鉴定NSCs；流式细胞术分析测定NSCs向TH阳性神经元方向的分化；高效液相色谱测定细胞培养上清液中多巴胺（dopamine，DA）含量。结果显示，分离培养的NSCs均为nestin阳性细胞；低氧可明显促进NSCs向神经元方向的分化；TH阳性神经元比例在常氧和低氧组分别为（10.25±1.03）％和（19.88±1.44）％。NSCs诱导分化7d后，低氧组细胞培养上清液中DA浓度明显增加，约为常氧组的2倍（{sl P}<0.05，{sl n}=8）。上述结果表明，3％低氧可促进NSCs向神经元方向，特别是向DA能神经元方向分化。这为NSCs应用于临床治疗帕金森病提供了基础。