槲皮素对豚鼠结肠平滑肌收缩性和钙通道的影响

本文研究槲皮素对豚鼠结肠的收缩性及对结肠平滑肌细胞电压依赖性钙通道的影响，以探讨槲皮素舒张结肠平滑肌 的机制。实验中用张力换能器记录结肠肌条的收缩，用木瓜蛋白酶分离近端结肠平滑肌细胞，全细胞膜片钳技术记录L 型钡 电流( I Ba,L，为了改善钙衰减，细胞外液中用钡离子代替钙离子)。实验观察到，槲皮素浓度依赖性地抑制结肠收缩，且能 拮抗乙酰胆碱和新斯的明(neostigmine)对结肠的收缩作用。吲哚美辛[环氧合酶(cyclooxygenase, COX)抑制剂]和亚甲蓝[鸟苷酸环 化酶(guanylate cyclase, GC)抑制剂]可以拮抗槲皮素舒张结肠平滑肌的作用。槲皮素浓度[EC50= (7.59±0.38) μmol/L]和电压依赖 性地增大结肠平滑肌细胞的IBa,L，使电流- 电压曲线的最大激活电压向去极化方向移动10 mV，但不改变IBa,L 的阈电位。槲 皮素向去极化方向移动稳态失活曲线约3.75 mV，但不改变激活曲线和失活曲线的斜率。H-89 [蛋白激酶A (protein kinase A, PKA)抑制剂]能够阻断槲皮素增大IBa,L 的作用，而cAMP 能够增强槲皮素增大IBa,L 的作用。这些结果说明槲皮素通过PKA途 径增大IBa,L。槲皮素通过GC 和COX 途径以及拮抗乙酰胆碱的作用来抑制结肠的收缩，而其增大钙离子内流的作用不足以抵消上述的抑制作用，从而表现为槲皮素对结肠的舒张作用。