前体脑源性神经营养因子抑制大鼠螺旋神经节神经元的存活和神经突再生

本文旨在研究前体脑源性神经营养因子(precursor brain-derived neurotrophic factor, proBDNF)对螺旋神经节神经元(spiral ganglion neurons, SGNs)生长的影响。取新生5天Sprague Dawley (SD)大鼠处死，分离出含有螺旋神经节的蜗轴，将其消化、吹打后用培养液重悬，接种于多聚-D-赖氨酸/层粘连蛋白包被过的8孔腔式载玻片，37 °C培养4 h获得贴壁牢固的原代SGNs。将SGNs随机分为对照组、BDNF组(10 ng/mL BDNF处理)、C10组(10 ng/mL proBDNF处理)、C50组(50 ng/mL proBDNF处理)、C100组(100 ng/mL proBDNF处理)，无血清培养48 h后行βIII tubulin荧光抗体标记染色，荧光显微镜下观察SGNs的存活数目和神经突再生情况。结果显示，C50组和C100组的SGNs存活数目低于对照组(P < 0.001)，且C10组、C50组和C100组的SGNs存活数目均低于BDNF组(P < 0.001)。根据SGNs的形态，可将其分为无突起和有突起两类。C10组、C50组、C100组的无突起SGNs比例均高于对照组，差异有统计意义(P < 0.001)。另外在添加20 μmol/L的特异性c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase, JNK)抑制剂SP600125后，C50组的SGNs存活数目提升至(91.5 ± 8.2)/孔，高于没有使用SP600125的C50组(P < 0.001)。以上结果说明，proBDNF减少体外培养SGNs的存活数目，并抑制SGNs神经突的出芽生长；使用特异性JNK抑制剂可以部分减轻proBDNF对SGNs存活的抑制作用。