沉默AEG-1基因逆转乳腺癌MCF-7/ADM细胞耐药性

本研究旨在分析星形细胞上调基因1 (astrocyte elevated gene-1, AEG-1)对乳腺癌MCF-7/ADM细胞化疗药物耐药性的影响，并探讨其作用机制。将MCF-7/ADM细胞在含1.0 mg/L阿霉素(adriamycin, ADM)的培养液中培养以维持细胞的耐药性；应用shRNA技术沉默乳腺癌MCF-7/ADM细胞中AEG-1基因表达；采用MTT比色法检测ADM对MCF-7/ADM的细胞耐毒作用，据以计算ADM的半数抑制浓度(IC50)；流式细胞术检测细胞凋亡；Western blot方法检测AEG-1、p53和多药耐药基因1 (multidrug resistance gene 1, MDR1)蛋白的表达水平以及Akt、MDM2和Bad的磷酸化水平。结果显示，乳腺癌MCF-7/ADM细胞的AEG-1蛋白水平显著高于MCF-7细胞(P < 0.05)，经shRNA干扰后AEG-1蛋白水平显著降低(P < 0.05)；沉默AEG-1基因能显著降低ADM对MCF-7/ADM细胞的IC50 (P < 0.05)，促进MCF-7/ADM细胞凋亡(P < 0.05)，并增强ADM对MCF-7/ADM细胞的促凋亡作用，抑制Akt、MDM2和Bad的磷酸化(P < 0.05)，促进p53蛋白表达(P < 0.05)，降低MDR1蛋白表达水平(P < 0.05)。结果表明，沉默AEG-1基因可通过促进MCF-7/ADM细胞凋亡和下调MDR1蛋白表达，以逆转MCF-7/ADM细胞对ADM的耐药性。