内质网应激介导氧化低密度脂蛋白所诱导的巨噬细胞清道夫受体A1上调

本文旨在研究内质网应激(endoplasmic reticulum stress, ERS)是否介导氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein, ox-LDL)所诱导的巨噬细胞清道夫受体A1 (scavenger receptor A1, SR-A1)上调。体外培养RAW264.7巨噬细胞，给予20 mmol/L ERS抑制剂4-苯丁酸(4-phenylbutyric acid, PBA)处理30 min后，再加入ox-LDL (50 mg/L)继续培养12 h或2 mg/L ERS诱导剂衣霉素(tunicamycin, TM)或2 μmol/L毒胡萝卜素(thapsigagin, TG)继续培养4 h。另外培养巨噬细胞分别给予0.5、1和2 mg/L TM处理4 h或给予2 mg/L TM 处理1、2和4 h。采用试剂盒检测细胞内总胆固醇(total cholesterol, TC)含量；分别采用免疫印迹法和实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)技术检测SR-A1和ERS标志分子糖调节蛋白78 (glucose-regulated protein 78, GRP78)蛋白和mRNA表达变化；采用多功能酶标仪检测Dil-ox-LDL摄取情况。结果显示，PBA显著抑制ox-LDL所诱导的巨噬细胞内胆固醇蓄积。ox-LDL可显著上调SR-A1和GRP78表达，而PBA可明显抑制ox-LDL所诱导的SR-A1上调(P < 0.05)，并使GRP78降低39.3% (P = 0.057)。TM明显上调SR-A1蛋白表达，并促进巨噬细胞对ox-LDL的摄取，且呈浓度和时间依赖性，但对SR-A1转录水平没有明显影响，且ERS另一诱导剂TG也可明显上调SR-A1表达；而PBA则明显抑制TM和TG所诱导的上述变化。以上结果表明，ERS在ox-LDL所诱导的SR-A1上调中具有重要作用，进而促使巨噬细胞摄取更多的ox-LDL，导致泡沫细胞形成。