丹参素通过SIRT1-SOD信号通路延缓大鼠主动脉内皮细胞老化

本研究旨在观察丹参素(Danshensu, DSS)预处理对大鼠主动脉内皮细胞(rat aortic endothelial cells, RAECs)老化的影响及机制。原代RAECs株传代培养到第四代为年轻组细胞(Young group)，传代至第十二代为老年组细胞(Old group)；自第四代起，给予DSS孵育到第十二代，即为DSS组细胞；自第四代起，联合给予DSS和细胞沉默信息调节因子1 (SIRT1)抑制剂尼克酰胺(NAM)孵育到第十二代，即为DSS+N组细胞。用细胞衰老β-半乳糖苷酶(SA β-gal)染色法鉴定细胞老化程度，DAPI荧光染色检测老化相关的异染色质位点(senescence associated heterochromatin foci, SAHF)的表达变化，硫代巴比妥酸(TBA)法和化学比色法检测RAECs中丙二醛(MDA)和过氧化氢(H2O2)含量，免疫印迹法测定细胞SIRT1、黄嘌呤氧化酶(XOD)和超氧化物歧化酶2(SOD2)的表达。结果显示，与年轻组相比，老年组细胞发生明显衰老，细胞SA β-gal阳性率、SAHF形成率、MDA及H2O2含量显著增加(均P < 0.01)；DSS处理能明显减少老年组细胞SA β-gal阳性率、SAHF形成率、MDA及H2O2含量(P < 0.05或P < 0.01)，SIRT1阻断剂可以逆转DSS对细胞的保护作用；免疫印迹结果显示，与年轻组相比，老年组细胞XOD蛋白表达增加，SIRT1和SOD2蛋白表达减少(P < 0.05或P < 0.01)，DSS可以使老年组细胞XOD蛋白表达减少，SIRT1和SOD2蛋白表达增加(P < 0.05)；而给予SIRT1阻断剂逆转DSS的作用。以上结果提示，DSS预处理能减轻RAECs的氧化应激水平，延缓细胞的衰老进程，其机制可能与SIRT1蛋白表达的上调有关。