重组肾上腺髓质素表达载体的构建及在哺乳动物细胞中的表达

为探索通过体内表达肾上腺髓质素(adrenomedullin, AM)治疗高血压和慢性心衰的可能性，本实验构建了重组AM真核表达载体，并在无内源性AM表达的凡62细胞株上进行了体外表达实验。实验中采用RT-PCR技术扩增AM cDNA片段，并将扩增的cDNA片段插入pcDNA3. 1真核表达质粒，构建成含AM cDNA的重组质粒pc DNA3. 1 AM。用脂质体介导将该质粒转染培养的人白血病细胞蛛62株。在转染的细胞中，用RT-PCR检测证实有AMm RNA存在;用斑点免疫分析方法检测转染细胞的培养液上清，证实有AM多肽存在，表明实验中构建的重组 pcDNA3. 1 AM载体能够在哺乳类细胞中表达AM.