低氧性微损伤时大鼠腓肠肌抗肌营养不良蛋白和结蛋白的变化

为了观察低氧性微损伤时大鼠腓肠肌抗肌营养不良蛋白(dystrophin)和结蛋白(desmin)的变化特征及其调节机制，本实验将雄性Sprague-Dawley 大鼠40 只随机分为常氧对照组和10% 氧浓度的低氧刺激1、2、4、7 d 组(n=8)，每组各取2 只大鼠进行伊文氏蓝(EBD)腹腔注射来检测肌纤维膜通透性，同时用异染ATP 酶法鉴别EBD 阳性肌纤维的类型；其余6 只采用Western blot、RT-PCR 和荧光法进行蛋白含量和基因表达等测定。结果显示，低氧第1 天即出现EBD 阳性纤维，主要为IIA和IIB 型。各低氧组的EBD 阳性细胞率和平均光密度均大于常氧对照组(P<0.05)。低氧第1 天dystrophin 和desmin 蛋白显著增加或有增加趋势，第2 天有所下降，第4 天又急剧增加，第7 天恢复至接近对照组水平，其变化呈波动性起伏；低氧组基因表达在第2 天开始大幅度增加，与蛋白含量变化趋势相对应。除了低氧第2 天外，其余各组钙激活中性蛋白酶(calpain)总活性均高于常氧对照组。热休克蛋白HSP70 和HSP90 分别在低氧第4 天和第7 天增加(P<0.05)。上述结果表明，机械应力并非细胞膜完整性破坏的唯一原因，但是仅靠低氧引起腓肠肌微损伤时的dystrophin 和desmin 变化与离心运动不一样，二者蛋白含量并没有出现明显的丢失。低氧性肌损伤的表现形式可能与肌纤维动员类型以及calpain 活性有密切关系。