藏羚羊低氧诱导因子1α基因的克隆与组织表达

为探讨低氧诱导因子1α (hypoxia inducible factor 1 alpha, HIF-1α)在藏羚羊(Pantholops hodgsonii)高原低氧适应机制中的作用，采用RT-PCR和RACE技术克隆藏羚羊HIF-1α基因的cDNA序列，同时采用real-time PCR和Western blot方法检测藏羚羊、藏系绵羊、平原绵羊HIF-1α的组织特异性表达，并进行比较分析。序列分析结果表明，克隆所得的cDNA序列为3 664 bp，包含2 471 bp的开放阅读框和1 191 bp的3’UTR区。它的编码区序列和预测的氨基酸序列与其它哺乳动物HIF-1α的相似性超过87%，其中与牛相似性最高，达到98%以上，表明该序列为藏羚羊HIF-1α基因的cDNA序列。基因表达检测结果显示，HIF-1α在藏羚羊的肺、心肌、骨骼肌中均有表达，其中肺的表达量最高，表现出明显的组织差异性。进一步研究表明，藏羚羊和藏系绵羊的HIF-1α蛋白在上述三种组织中的表达量均高于平原绵羊，并且HIF-1α mRNA和蛋白在藏羚羊心、肺和骨骼肌中的表达量高于藏系绵羊。提示HIF-1α的低氧特异表达是藏羚羊高原低氧适应的分子基础。