在低氧预处理延迟心肌保护中钙网蛋白表达升高

该文分别在整体实验和细胞培养条件下研究钙网蛋白（calreticulin，CRT）在低氧预处理（hypoxic preconditioning，HPC）延迟心肌保护中的表达及其信号转导机制。（1）整体实验时Wistar大鼠随机分为3组：假手术（sham）组、仅结扎冠状动脉的心肌缺血（myocardial infarction，MI）组和HPC后再结扎冠状动脉的HPC+MI组，分别于术后24h、14d和28d观察HPC对缺血后心功能和梗死区、危险区面积的影响；采用Western blot检测CRT表达以及p38丝裂素活化蛋白激酶（p38 mitogen--activated protein kinase，p38MAPK）、应激活化蛋白激酶（stress--activated protein kinase，SAPK）活性。（2）原代培养Sprague--Dawley乳鼠心肌细胞，随机分为6组：低氧，复氧（hypoxia／reoxygenation，H／R）组、HPC组、HPC+H，R组、p38 MAPK抑制剂SB203580+HPC+H／R（SB+HPC+H／R）组、SAPK抑制剂SP600125+HPC+H/R（SP+HPC+H／R）组和正常对照组；采用台盼蓝排斥实验、乳酸脱氢酶（1actate dehydrogenase，LDH）活性检测及流式细胞仪检测各组细胞损伤情况；采用Western blot检测CRT表达及p38 MAPK、SAPK的磷酸化水平。主要结果如下：（1）整体动物实验结果表明，HPC改善缺血对心肌左室压力最大上升，下降速度（±dp／dt_(max)）的抑制，限制心肌梗死面积；HPC后CRT表达呈动态变化：术后24h时HPC+MI组CRT表达增高106％（{sl P}<0.05 vs MI组），以危险区最为显著；14d至28d表达逐步降低。相关分析显示，术后24h时CRT表达量与心功能呈正相关（{sl r}=0.9867，{sl P}<0.05），与梗死面积呈负相关（{sl r}=--0.9709，{sl P}<0.05）。（2）细胞培养实验结果表明，HPC可减轻H／R诱导的心肌细胞LDH漏出，增加心肌细胞存活率，降低细胞凋亡；单纯HPC可诱导CRT表达轻度增加（222％，{sl P}<0.05 vs 对照组），而损伤性H／R诱导CRT过表达（503％，{sl P}<0.05 vs 对照组），HPC可降低H／R诱导CRT表达升高的幅度；p38 MAPK活性与HPC诱导的CRT表达呈正相关（{sl r}=0.9021，{sl P}<0.05），而SAPK活性与其呈负相关（{sl r}=--0.8211，{sl P}<0.05）。由此得出结论：（1）整体实验中HPC可明显改善缺血后心脏的收缩与舒张功能，限制心肌梗死范围，促进危险区心肌恢复；心肌梗死早期，HPC诱导CRT表达上调，参与心肌保护；（2）细胞培养实验中HPC可诱导CRT适度表达，增强原代培养乳鼠心肌细胞对H／R损伤的抵抗力；p38 MAPK可能介导HPC诱导的CRT表达，而SAPK激活可能不利于心肌保护。