腹膜淋巴孔与淋巴转归NO-cGMP-Ca~(2+)信号转导途径研究

为研究一氧化氮(nitric oxide, NO)调节大鼠腹膜淋巴孔和淋巴吸收的细胞内信号转导机制。在体外培养的间皮细胞上，利用cGMP检测试剂盒和激光共聚焦扫描显微镜，研究NO对间皮细胞内cGMP和游离[Ca~(2+)]_(i)的影响；并利用动物实验研究NO-cGMP-Ca~(2+)通路，对大鼠腹膜淋巴孔和淋巴吸收的影响。结果发现：（1）与对照组相比，NO供体Sper/NO（spermine/nitric oxide complex）可以剂量依赖性地升高间皮细胞内cGMP的浓度（P<0.01）。此作用可被可溶性鸟苷酸环化酶（soluble guanylyl cyclase, sGC）特异性抑制剂1H-[1,2,4]噁二唑[4,3-a]喹喔啉-1-one酮（1H-[1,2,4] oxadiazolo [4,3-a] quinoxalin-1-one, ODQ）阻断（P<0.05，P<0.01）。 Sper/NO可使间皮细胞内游离[Ca~(2+)]_(i) 相对水平降低(P<0.05)，但此效应可被ODQ阻断；L-型电压依赖性钙通道阻滞剂nifedipine，可使细胞内的游离[Ca~(2+)]_(i)在短时间内迅速明显下降(P<0.05)，达平衡后再加入的Sper/NO并不能引起细胞内Ca~(2+)浓度的进一步改变(P>0.05)。（2）NO可以剂量依赖性地提高大鼠膈组织淋巴孔最大分布面积(P<0.01) 和对示踪剂的吸收量(P<0.05)，ODQ可明显抑制NO引起的淋巴孔和淋巴吸收的改变(P<0.01)。该结果首次发现nifedipine能显著增加淋巴孔最大分布面积(P<0.01)及膈组织对台盼蓝的吸收量(P<0.05)，而且nifedipine预处理后Sper/NO并不能使淋巴孔的淋巴吸收进一步升高 (P>0.05)。结果提示，NO可以通过降低cGMP水平降低大鼠腹膜间皮细胞内游离[Ca~(2+)]_(i)，且此过程和L-型电压依赖性钙通道有关；NO可通过NO-cGMP-[Ca~(2+)]_(i)通路，促进淋巴孔的开放和吸收。