褪黑素对异丙肾上腺素诱导大鼠tau蛋白过度磷酸化的预防作用

异常过度磷酸化的微管相关蛋白tau是阿尔茨海默病(AD)患者大脑中神经原纤维缠结的主要组成部分。迄今为止，尚无有效的措施阻止tau蛋白的过度磷酸化。为探讨褪黑素（melatonin，Mel）对AD样tau蛋白过度磷酸化的预防作用，我们以β受体激动剂异丙肾上腺素（isoproterenol，IP）来复制AD样tau蛋白过度磷酸化的动物模型，并以褪黑素作为保护组药物，在大鼠双侧海马注射IP 前，于腹腔连续注射5天。应用磷酸化位点特异性抗体(PHF-1和Tau-1)作免疫印迹和免疫组织化学检测tau蛋白的磷酸化水平，并用非磷酸化依赖的总tau蛋白抗体(111e)进行标准化。免疫印迹结果显示：在IP注射48小时后，tau蛋白在PHF-1表位的免疫反应显著增强，在Tau -1表位显著减弱，表明tau蛋白在Ser396/Ser404 (PHF-1)和 Ser199/Ser202 (Tau-1)位点有过度磷酸化。免疫组织化学染色结果与免疫印迹结果相似，主要检测到在大鼠海马CA3区的神经纤维有tau蛋白过度磷酸化。褪黑素预处理大鼠可有效地阻止由IP诱导tau蛋白在Tau-1和PHF-1位点的过度磷酸化。该结果提示：褪黑素可预防大鼠脑组织中由异丙肾上腺素引起的AD样tau蛋白的过度磷酸化。