亚低温状态下冷诱导RNA结合蛋白调节氧化还原系统对海马神经元的保护作用

本文旨在探讨冷诱导RNA结合蛋白(cold inducible RNA-binding protein, CIRP)是否通过抑制氧自由基的生成而起到抑制神经元凋亡的作用。采用体外分离培养的原代大鼠海马神经元，随机分为5组：常温对照组(37 ℃)、空病毒感染组、CIRP过表达组、CIRP干扰组、亚低温32 ℃处理组。将后四组移入32 ℃含有5% CO2培养箱内培养。采用Annexin V-FITC/PI标记后用流式细胞术对海马神经元进行细胞凋亡检测、Western blot检测CIRP的表达，同时采用ELISA方法进行相关氧化还原指标(T-AOC, GSH-Px, SOD, MDA)检测。Western blot及流式凋亡检测结果显示：与常温对照组相比，单纯亚低温处理组及CIRP过表达组海马神经元中CIRP的表达量明显增加(P < 0.01)，神经元的凋亡率明显下降；而干扰CIRP的表达后，与单纯亚低温处理组相比，细胞凋亡的数目则明显增加(P < 0.05)。相关氧化还原指标检测结果显示：亚低温32℃处理组、CIRP 过表达组与常温对照组、CIRP 干扰组、空病毒感染组相比均有显著差异(P < 0.05或P < 0.01)。以上结果表明：亚低温处理通过上调CIRP的表达，抑制细胞内氧自由基的生成，从而直接或间接地抑制了氧自由基诱导的神经元凋亡，进而起到海马神经元的保护作用。