GDP在体外对大鼠脑线粒体脱耦联蛋白活性和表达的影响

该研究通过GDP体外处理大鼠脑组织块,观察GDP对脑线粒体脱耦联蛋白(uncoupling proteins,UCPs)活性、UCP4和UCP5表达的影响,以探讨嘌呤核苷酸对大鼠脑UCPs的调节作用。取Sprague--Dawley大鼠双侧大脑半球,将脑组织切成约8--10 mm~(3)的脑组织块,与含1 mmol/L GDP的孵育介质共孵育30min后,匀浆并差速离心分离提取大鼠脑组织线粒体,采用[~(3)H]--GTP结合法测定UCPs活性,并以Scatchard作图法计算两者结合的解离常数(K_(d))和最大结合量(B_(max));RT--PCR和Western blot分别检测UCP4和UCP5的mRNA和蛋白表达。结果显示,1mmol/LGDP可降低体外大鼠脑组织线粒体中UCPs与[~(3)H]--GTP结合的B_(max),提高K_(d),但对脑组织中UCP4和UCP5 mRNA和蛋白表达量的改变无统计学意义。上述结果提示,GDP可直接抑制体外大鼠脑组织中UCPs的活性,但并不影响UCP4和UCP5的表达。