香烟提取物活化大鼠支气管平滑肌细胞蛋白激酶C亚型及下调钾通道BK_(Ca)、Kv1.5表达

大电导的钙活化钾通道(large--conductance calcium--activated potassium channel,BK_(Ca))和电压依赖性钾通道Kv1.5在气道高反应性的发生机制中具有重要作用。已知吸烟可致气道高反应,但钾通道的变化在其发病中的作用尚需进一步阐明。该文旨在研究香烟提取物(cigarette smoke extract,CSE)对培养的大鼠支气管平滑肌细胞(bronchial smooth muscle cells,BSMCs)钾通道BK_(Ca)和Kv1.5表达的直接作用,以及蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)在其中的作用。实验采用原代培养大鼠BSMCs,用5%CSE刺激,免疫印迹检测PKC亚型的表达和转位,半定量RT--PCR、免疫印迹实验检测BK_(Ca)和Kv1.5的mRNA和蛋白表达,然后用PKC抑制剂BIM和G？e6983与CSE共作用,检测其对BKCa和Kv1.5的mRNA和蛋白表达的影响。结果显示,5%CSE使PKC#epsilon#、#eta#、#thet#发生明显的膜转位,并使BK_(Ca)和Kv1.5的蛋白和mRNA表达明显降低;选择性PKC抑制剂BIM或G？e6983与CSE共同作用,均可使BK_(Ca)和Kv1.5的蛋白和mRNA表达部分恢复。上述结果提示,CSE可引起BSMCs的BKCa和Kv1.5表达下调,PKC#epsilon#、#eta#、#thet#参与其信号转导。