二氮嗪预处理上调Bcl--2/Bax蛋白比值减少缺氧复氧所致体外培养的海马神经元凋亡

线粒体内膜ATP敏感钾通道(mitochondrial ATP--sensitive potassium channel, mitoK_(ATP)通道)的激活在药物预处理增强神经元对各种损伤的耐受力过程中发挥着重要作用。神经元内含有丰富的mitoK_(ATP)通道，二氮嗪(diazoxide, DZ)为选择性的mitoK_(ATP)通道开放剂，该实验探讨了DZ预处理能否减少缺氧复氧所致的海马神经元凋亡，以及DZ如何调控Bcl--2蛋白和Bax蛋白的表达。原代培养9---10 d的Sprague--Dawley大鼠海马神经元随机分为5组：对照组、DZ 0 #mu#mol/L、DZ 30 #mu#mol/L、DZ 100 #mu#mol/L和DZ 100 #mu#mol/L+5--羟癸酸(5--hydroxydecanoate, 5--HD) 100 #mu#mol/L。除对照组外，其他四组神经元自缺氧前3 d开始，每天DZ预处理1 h，连续3 d。体外缺氧4 h，于复氧后24 h，四唑蓝比色法测定海马神经元存活率，annexin V--FITC流式细胞术测定凋亡率，Western blot法检测Bcl--2和Bax蛋白的表达量。结果显示：与对照组比较，缺氧复氧损伤显著降低海马神经元的存活率，升高凋亡率。与其他浓度比较，100 #mu#mol/L DZ预处理使神经元存活率升高约15%，而凋亡率降低约12%；Bcl--2蛋白表达增强约60%，Bax蛋白表达下降近30%。5--HD消除DZ对神经元的保护作用。因此，100 #mu#mol/L DZ可通过上调Bcl--2蛋白表达，降低Bax蛋白表达，减少缺氧复氧后海马神经元的凋亡。