MAPK/PKC信号通路在原癌基因c-erbB2 调控原始卵泡启动生长中的作用

本研究旨在探讨原癌基因c-erbB2 在原始卵泡启动生长中的调控作用，及其在信号通路中与丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)和蛋白激酶C (protein kinase C, PKC)的上下游关系。实验通过脂质体介导c-erbB2siRNA 转染体外培养的卵巢，用RT-PCR 法检测原癌基因c-erbB2 mRNA 的表达，用Western blot 检测ErbB2、MAPK 和PKC 蛋白的表达；用 MAPK 及PKC 通路特异性抑制剂PD98059 和Calphostin 加入培养液中，培养卵巢8 d 后检测c-erbB2mRNA及ErbB2 蛋白的表达；HE 染色进行卵泡启动生长组织学观察。结果显示，c-erbB2 siRNA转染卵巢后，c-erbB2 mRNA水平明显下调(P<0.01)，ErbB2、MAPK 和PKC 蛋白的表达也明显下调(P<0.01) ；而在培养液中加入特异性抑制剂PD98059和Calphostin，卵巢c-erbB2 mRNA 的表达和ErbB2 蛋白表达均无明显变化(P>0.05) ；与对照组比较，培养8 d 后siRNA 组初级卵泡和次级卵泡数明显减少(P<0.01)，抑制剂组原始卵泡数增多(P<0.01)，次级卵泡数明显减少(P<0.05 或P<0.01)。以上结果提示，c-erbB2 可能是调控原始卵泡启动生长中的蛋白激酶MAPK 和PKC 的上游激活物。