APC蛋白、GSK3#beta#在吸烟小鼠气道上皮损伤修复中的动态变化

为了探讨结肠腺瘤性息肉病(adenomatous polyposis coli,APC)蛋白、糖原合成酶激酶3#beta#(glycogen synthase kinase 3#beta#,GSK3#beta#)在吸烟致气道上皮细胞(airway epithelial cell,AEC)损伤修复中的作用,该实验建立了吸烟导致AEC损伤修复的小鼠模型,采用HE染色、免疫组织化学染色、免疫荧光共聚焦成像和Western blot方法,观察损伤修复过程中APC蛋白、GSK3#beta#在AEC中表达及分布的动态变化。结果显示：(1)随着吸烟时间延长,AEC形态学上呈现损伤(1、4周)、修复(8周)、再损伤(12周)的变化。(2)免疫组化染色显示：AEC中APC蛋白表达在吸烟1周时较对照组明显增强,4周时较对照组明显减弱,8、12周时均较4周时增强但与对照组无差异；对照组GSK3#beta#表达较强,吸烟组表达较对照组均减弱。Western blot检测小鼠肺组织中APC蛋白、GSK3#beta#的表达变化与免疫组化结果一致,磷酸化GSK3#beta#(p--GSK3#beta#)在吸烟组的表达较对照组均有不同程度增高,尤以吸烟1周时明显。(3)荧光共聚焦成像显示：对照组APC蛋白在AEC胞质内均匀分布，吸烟1、8周时定位发生改变，呈簇状聚集于AEC腔面和侧面质膜下；GSK3#beta#在对照组和吸烟组AEC胞质内均匀分布，无定位改变。由上述结果可见，吸烟致小鼠AEC损伤修复过程中APC蛋白表达量及在胞质内分布呈动态变化，同时伴有GSK3#beta#表达量下调和磷酸化水平增高，提示二者可能通过参与修复中细胞迁移、分裂增殖等活动，在气道上皮损伤修复过程中发挥重要作用。