肝细胞生长因子对抗过氧化氢诱导的大鼠皮质神经元线粒体途径凋亡

肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor, HGF)能对抗多种因素引起的细胞凋亡，从而起到保护细胞的作用。为 了研究HGF 对过氧化氢(H2O2)诱导的大鼠皮质神经元凋亡的对抗作用及其对凋亡的线粒体途径的影响，我们分离培养原代 大鼠皮质神经元，HGF (15~60 ng/mL)预处理24 h 后，用100 μmol/L H2O2 诱导神经元凋亡。采用MTT 比色法检测细胞存 活率；应用Hoechst 33258 染色和流式细胞仪检测神经元的凋亡；比色法检测细胞乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH) 漏出率和caspase-3 活性；激光共聚焦检测线粒体跨膜电位变化，Western blot 检测神经元细胞色素C 蛋白表达的变化。结 果显示，100 μmol/L H2O2 处理4 h 的大鼠神经元的细胞存活率下降为正常对照组的(53.4±7.4)%，LDH 漏出率上升为 (37.8±5.3)%，细胞凋亡率为(62.8±7.1)%，细胞caspase-3 活性显著升高(P<0.05)。与H2O2 处理组相比，用15~60 ng/mL HGF 预处理24 h 的大鼠神经元的细胞存活率升高，细胞凋亡率、LDH 漏出率以及caspase-3 活性均显著降低(P<0.05)；而 且HGF 预处理可逆转H2O2 诱导的神经元线粒体跨膜电位降低，使神经元的细胞色素C 蛋白表达减少。上述结果提示，HGF 具有对抗H2O2 诱导大鼠皮质神经元凋亡的作用，其作用机制可能与HGF抑制凋亡的线粒体途径，降低神经元caspase-3 活性 有关。