孕酮促进小鼠胚胎干细胞的增殖和存活能力

已有研究表明雌二醇刺激小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cells, mES cells)的增殖，为了探讨另一种甾体激素— 孕酮对mES 细胞增殖的影响，本研究分别采用MTT 实验和BrdU 掺入实验获得增殖曲线，克隆形成实验(clone forming assay) 检测孕酮对单细胞存活能力和增殖能力的影响，Western blot 检测胚胎干细胞特异的标志基因Oct-4 的表达，流式细胞术 (fluorescence activated cell sorting, FACS)检测细胞周期，以及real-time PCR 检测细胞周期有关的基因和部分原癌基因的表达。 结果显示，和雌激素一样，孕酮也具有促mES 细胞增殖的作用。在孕酮处理组，克隆数目比对照组显著增多。Western blot 结果显示在孕酮处理组，Oct-4 表达变化不大，mES 仍处在干细胞状态。FACS 结果显示：加入孕酮后，和对照组相比， mES 处在S+G2/M 期的细胞比例增多。Real-time PCR 结果显示孕酮处理使细胞周期蛋白(cyclins)、细胞周期蛋白依赖的蛋白激 酶(cyclin-dependent kinases)、c-myc、c-fos 基因表达上调。以上结果提示，孕酮促进mES 细胞增殖和存活能力，孕酮促增 殖的作用可能和上述细胞周期有关基因的表达上调有关。