17#beta#--雌二醇对延迟着床期小鼠子宫内膜基质细胞内钙的快速调节效应

该文旨在研究17#beta#--雌二醇(17#beta#--estradiol,E_(2))对延迟着床期小鼠子宫内膜基质细胞内钙振荡的影响和机制,探讨E_(2)对着床期子宫内膜基质细胞是否存在非基因组快速作用。实验的第一部分,小鼠分为6组,每组4只,即0.1%二甲基亚砜(dimethylsulfoxide,DMSO)对照组、1×10~(-8)mol/L牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)对照组、1×10~(-8)mol/L E_(2)组、1×10~(-8)mol/L E_(2)--BSA组、1×10~(-8)mol/L E_(2)+无钙液组、1×10~(-8)mol/L E_(2)+5#mu#g/mL他莫西芬(tamoxifen)组。急性分离延迟着床小鼠孕第7天子宫内膜基质细胞,应用激光共聚焦显微镜技术实时检测各组基质细胞[Ca~(2+)]_(i)的变化。实验的第二部分,分离7只延迟着床小鼠孕第7天子宫内膜基质细胞,用免疫荧光法检测1×10~(-8)mol/L E_(2)作用前和作用后5min、15min、30min细胞内磷酸化磷脂酶C(phospholipase C,PLC)的变化。基质细胞[Ca~(2+)]_(i)的变化结果显示,在E_(2),E_(2)--BSA和E_(2)+无钙液组中[Ca~(2+)]_(i)均明显升高,15min达到高峰，随后下降回到基础值。但DMSO和BSA组中[Ca~(2+)]_(i)未见明显变化；加入传统雌激素胞浆受体阻断剂tamoxifen不能抑制E_(2)引起的[Ca~(2+)]_(i)升高。免疫荧光结果显示，加入1×10~(-8) mol/L E_(2)后，PLC的磷酸化水平升高，15 min达高峰({sl P}<0.001)，然后逐渐下降回到基础值。结果提示，E_(2)对延迟着床小鼠子宫内膜基质细胞内[Ca~(2+)]_(i)的变化具有快速调节效应，该作用可能是通过非基因组途径实现的，与磷酸化PLC信号途径有关。