Eph/Ephrin--B1通过Src酪氨酸激酶/丝裂原活化蛋白激酶信号抑制睫状神经节神经元的尼古丁乙酰胆碱受体电流

该研究旨在探讨Eph/Ephrin--B1信号对急性分离的鸡胚睫状神经节(ciliary ganglion,CG)神经元上#alpha#3--尼古丁乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptors,#alpha#3--nAChRs)和#alpha#7--尼古丁乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptors,#alpha#7--nAChRs)电流的影响及可能机制。用膜片钳技术在急性分离的CG神经元上分别记录#alpha#3--nAChRs和#alpha#7--nAChRs全细胞电流。为检测Ephrin--B1对细胞nAChRs电流的影响,细胞被随机分为:对照组、Ephrin--B1Fc处理组(用Ephrin--B1与IgG重组后形成的Ephrin--B1Fc刺激细胞)、IgG处理组(用与Ephrin--B1Fc处理组重组所需的相同浓度的IgG刺激细胞)和Ephrin--B1处理组(用与Ephrin--B1Fc处理组重组所需的相同浓度的Ephrin--B1刺激细胞)。为探讨Ephrin--B1调节细胞nAChRs电流的机制,分别用Src信号抑制剂PP2和丝裂原活化蛋白激酶(mitogen--activated protein kinase,MAPK)信号抑制剂PD98095预处理细胞后,再用Ephrin--B1Fc处理细胞,观察#alpha#3--nAChRs和#alpha#7--nAChRs电流的变化,细胞被随机分为:对照组、Ephrin--B1Fc处理组、PP2或PD98095(PP2/PD)处理组、Ephrin--B1Fc+PP2或PD98095处理组。结果显示:对照组、IgG处理组和Ephrin--B1处理组之间#alpha#3--nAChRs和#alpha#7--nAChRs电流无显著差异,而Ephrin--B1Fc处理组可显著抑制#alpha#3--nAChRs和#alpha#7--nAChRs电流,与对照组比较有显著差异({sl P}=0.002、{sl P}=0.003);此外,PP2可部分恢复被Ephrin--B1Fc所抑制的#alpha#7--nAChRs电流,PD98095则可部分恢复被Ephrin--B1Fc所抑制的#alpha#3--nAChRs电流。以上结果提示,Eph/Ephrin--B1信号可能分别通过MAPK和Src信号途径抑制急性分离的CG神经元上#alpha#3--nAChRs和#alpha#7--nAChRs的电流,表明Eph/Ephrin--B1可能参与交感神经系统功能的调控。